Midgut of the diplopod Urostreptus atrobrunneus: structure, function, and redefinition of hepatic cells / Intestino médio do diplópodo Urostreptus atrobrunneus: estrutura, função e redefinição das células hepáticas

Abstract Diplopods are considered important macroarthropods the soil as part of its maintenance and balance. These animals usually do not occur in high densities, but population explosions caused by environmental disturbances, climate changes, and use of pesticides that eliminate possible competitors, have been reported. The millipede Urostreptus atrobrunneus Pierozzi and Fontanetti, 2006 have become a nuisance to humans in infestation sites in urban centers of the state of Sao Paulo, Brazil. As a contribution to the understanding of this potential pest, this study describes the histology, histochemistry, and ultrastructure of the U. atrobrunneus midgut, and presents the redefinition of hepatic cells somewhat controversial in the literature. The region of the midgut is characterized by the absence of a cuticular intima, and composed of a pseudostratified epithelium on a thick basal membrane, followed by a muscle layer, a layer of hepatic cells, lined by an external membrane. The morphology observed in U. atrobrunneus is similar to that reported for other species of diplopods. The hepatic cells have been previously described as randomly without forming a layer, however, the present results clearly demonstrate that these cells form a continuous layer over the whole midgut.

Resumo Diplópodos são considerados importantes macro-artrópodes do solo, uma vez que participam de sua manutenção e equilíbrio. Comumente estes animais não apresentam população numerosa, porém há relatos de explosões populacionais ocasionadas por desequilíbrios ambientais, mudanças climáticas e utilização de pesticidas que eliminam possíveis competidores. O milípede Urostreptus atrobrunneus Pierozzi e Fontanetti, 2006, têm apresentado pontos de infestação em centros urbanos, do estado de São Paulo, Brasil, causando muitos transtornos à população humana. Com objetivo de contribuir para o conhecimento desta potencial praga, este trabalho apresenta a descrição histológica, histoquímica e ultra-estrutural do intestino médio do milípede U. atrobrunneus, bem como apresenta a redefinição das células hepáticas, um tanto controversa na literatura pertinente. A região do intestino médio é caracterizada pela ausência da íntima cuticular, sendo formado por um epitélio pseudoestratificado, apoiado por uma membrana basal espessa, seguido de uma camada muscular, uma camada de células hepáticas, revestido por uma membrana externa. A morfologia observada neste trabalho assemelha-se bastante com as descrições de outras espécies de diplópodos estudadas até o momento. As células hepáticas foram previamente descritas como dispostas aleatoriamente sem a formação de uma camada, contudo, os presentes resultados demonstram claramente que estas células formam uma camada contínua ao longo de todo o intestino médio.

Ultrastructural lesions in the myocardium and kidneys of rabbits in experimental acute Amorimia exotropica poisoning / Lesões ultra-estruturais no miocárdio e rins de coelhos na intoxicação experimental aguda por Amorimia exotropica

Amorimia exotropica is an important plant associated with sudden death in cattle in Southern Brazil. In order to understand the mechanisms by which A. exotropica causes acute lesions in the heart and kidney of intoxicated animals, an experiment was conducted to determine the histopathology and ultrastructure of myocardial and renal lesions of intoxicated rabbits. After receiving 18g/kg of dried plant, six rabbits died suddenly. At necropsy, the liver was swollen and no other macroscopic lesions were observed. Histologically, centrolobular and midzonal hepatocytes were vacuolated. These vacuoles were strong PAS stained positive, suggesting that they corresponded to glycogen accumulations. In some regions of the ventricular septum and ventricles were found vacuoles of different sizes and the kidneys of two rabbits showed vacuolar degeneration on distal convoluted tubules. Ultrastructurally, the myocardium had cardiomyocytes swelling with separation of myofibrils bundles and rupture and disorganization of the sarcomeres. The mitochondria displayed swelling, disorganization, disruption of the mitochondrial cristae, and electron-dense matrix. Some mitochondria exhibited eccentric projections of their membranes with disruption of both outer and inner membranes. The sarcoplasmic reticulum had no alterations, whereas the T-tubule system was occasionally dilated and ruptured. The kidneys had mitochondrial swelling with disorganization and disruption of the mitochondrial cristae. The vacuoles result from the swelling of the endoplasmatic reticulum and usually were located between two basolateral infoldings and mitochondria, occurring preferentially around the nucleus. The myocytes and T system damages induced by A. exotropica result in acute heart failure and death. Furthermore, this mechanism of cardiotoxicity may be common to all plant containing monofluoroacetate.

Amorimia exotropica é uma importante planta associada à morte súbita em bovinos no Sul do Brasil. Visando compreender os mecanismos pelos quais a A. exotropica provoca lesões agudas no coração e rins de animais intoxicados, foi conduzido uma intoxicação experimental em coelhos para determinar a histopatologia e ultraestrutura da lesão miocárdica e renal. Depois de receber 18g/kg de planta seca, seis coelhos morreram subitamente. Na necropsia, o fígado apresentava acentuação do padrão lobular. Os demais órgãos não apresentaram alterações macroscópicas. Histologicamente, os hepatócitos centrolobulares e mediozonais estavam vacuolizados e coraram-se fortemente com PAS. Em algumas regiões foram observados vacúolos de diferentes tamanhos no septo ventricular e ventrículos e os rins de dois coelhos mostraram degeneração vacuolar nos túbulos contorcidos distais. Ultraestruturalmente, o miocárdio apresentou cardiomiócitos tumefeitos com separação das bandas de miofibrilas e ruptura e desorganização dos sarcômeros. As mitocôndrias estavam tumefeitas exibindo desorganização das cristas mitocondriais, e a matriz estava eletrodensa. Algumas mitocôndrias exibiam projecções excêntricas das suas membranas com ruptura das membranas externas e internas. O retículo sarcoplasmático não tinha alterações, e os túbulos T estavam ocasionalmente dilatados e rompidos. Os rins apresentavam tumefação mitocondrial com desorganização e ruptura das cristas mitocondriais. Os vacúolos resultam da expansão do retículo endoplasmático e foram localizados geralmente entre duas invaginações basolaterais e as mitocôndrias, ocorrendo preferencialmente ao redor do núcleo. A lesão nos miócitos e o dano no sistema T induzido pela A. exotropica resultam na insuficiência cardíaca aguda e morte. Este mecanismo de cardiotoxicidade pode ser comum a todas as plantas contendo monofluoroacetato.

Ultrastructure of the epithelium lining of cauda epididymidis in mongrel dogs / Ultraestrutura do epitélio de revestimento da cauda epididimária em cães sem raça definida

The epithelium lining of cauda epididymidis in mongrel dogs was examined by transmission electron microscopy. The epididymal epithelium is pseudostratified with stereocilia and is composed predominantly of principal and clear cells. Therefore, exist basal and apical cells. The principal and clear cells show features suggesting that they may be preferentially involved in absorptive and secretive functions. These results are compared with previously published data on the cauda epididymidis of other mammalian species, in order to understand the significance of the epididymis in sperm maturation.(AU)

O epitélio de revestimento da cauda epididimária em cães sem raça definida foi examinado através da microscopia eletrônica de transmissão. O epitélio epididimário é pseudoestratificado com estereocílios na borda luminal e é composto principalmente por células principais e claras. Além destes tipos, foi observado algumas células basais e apicais. As células principais e claras apresentaram características ultra-estruturais que sugerem que as mesmas estão envolvidas com funções absortivas e secretórias. Os resultados foram comparados com estudos prévios realizados na cauda do ducto epididimário de outros mamíferos, com o objetivo de melhor entender o papel do epidídimo na maturação espermática.(AU)

Ultrastructural characterization of bovine umbilical cord blood cells / Caracterização ultra-estrutural das células sanguíneas do cordão umbilical bovino

The umbilical cord blood (UCB) is an important source of pluripotent stem cells, which motivated researches on ontogeny and transplantation. The morphological characterization of umbilical cord cells is the first step to establish subsequent experiments on these areas. Although some information on humans can be found, no data on UCB is available for bovines. Therefore, this work is the first attempt to conduct an ultrastructural characterization of bovine umbilical cord blood. Blood was collected from the umbilical cord of twenty fetuses by punction of the umbilical vein. Samples were processed for whole leucocytes observation by centrifugation and the buffy coat was collected. Cells were washed and pelleted and prepared according to the standard protocol of the transmission electron microscopy. The presence of cells with morphologic characteristics compatible with the precursors from the erythrocytic, neutrophilic, eosinophilic, basophilic, and lymphocytic lineages was observed. Atypical cells with peculiar morphological features, strongly similar to apoptotic cells, were seen. Bovine neutrophils with three types of cytoplasmic granules were also found in the blood. The ultrastructural characteristics of observed bovine UCB cells where similar to those found in other species, suggesting that bovines could possibly constitute an experimental model for approaches on UCB cells research.

O sangue de cordão umbilical (SCU) é uma importante fonte de células progenitoras pluripotentes, que motiva pesquisas em ontogenia e transplantes. A caracterização morfológica das células de cordão umbilical é o primeiro passo para se estabelecer experimentos subsequentes nessas áreas. Embora algumas informações sobre SCU em humanos possam ser encontradas, não existe nenhuma informação disponível sobre elas em bovinos. Portanto, este trabalho é a primeira tentativa de se conduzir uma caracterização ultra-estrutural do sangue de cordão umbilical bovino. O sangue foi coletado do cordão umbilical de 20 fetos por punção da veia umbilical. As amostras foram processadas para observação dos leucócitos totais por centrifugação pela coleta do botão leucocitário. As células foram lavadas, peletizadas e preparadas de acordo com protocolo padrão para microscopia eletrônica de transmissão. A presença de células com características morfológicas compatíveis com precursores das linhagens eritrocítica, neutrofílica, eosinofílica, basofílica e linfocítica foram observadas. Células atípicas com características morfológicas peculiares muito semelhantes a células em apoptose foram observadas. No sangue do cordão umbilical também foi encontrado neutrófilos bovinos apresentando três tipos de grânulos citoplasmáticos. As características ultraestruturais do SCU bovino foram semelhantes às encontradas em outras espécies, sugerindo que esta espécie possa servir como modelo experimental para abordagens em pesquisa sobre sangue de cordão umbilical.

Palynological analysis of Sphaeropteris gardneri (Cyatheaceae, Pteridophyta)

The spore morphology and wall ultrastructure of Sphaeropteris gardneri (Hook.) R.M. Tryon from Brazil were analyzed with LM, SEM and TEM. The spores are trilete with an ornamentation formed of short low ridges with spines in their margins. The exospore is 2.5μm thick, two- layered in section and single or branched channels are present. The perispore is 1.2μm thick and two-layered. The inner layer has three strata: the inner stratum is formed of a network of branched and fused threads, the middle stratum has threads with a radial orientation and in the outer stratum thin, dark fibres are immersed in a less dense contrasted matrix. The outer layer of the perispore is the one that forms the echinate-ridges and is constituted of threads arranged in a compact way. Globules of different sizes are observed on the surface. The differences found in the perispore ornamentation and ultrastructure in Alsophila, which was previously studied, and those of Sphaeropteris, show a tendency to wall complexity.

A morfologia dos esporos e a ultraestrutura da parede de Sphaeropteris gardneri (Hook.) R.M. Tryon, Brasil, foram analisadas com MO, MEV e MET. Os esporos são trilete com uma ornamentação formada por cristas curtas e baixas e com espinhos em suas margens. O exosporo possui 2,5μm de espessura, duas camadas em secção e estão presentes canais simples ou ramificados. A camada interna possui três estratos: o estrato interno é formado por uma rede de filamentos ramificados e fusionados, o estrato médio tem fios com uma orientação radial e no estrato externo fino, fibras escuras estão imersas em uma matrix menos densa. A outra camada do perisporo é a que forma as cristas equinatas e é constituída de filamentos dispostos em um arranjo compacto. Glóbulos de diferentes tamanhos são observados na superfície. As diferenças encontradas na ornamentação do perisporo e na ultraestrutura do Alsophila estudado previamente e aqueles de Sphaeropteris mostram uma tendência à complexidade da parede.

Morfologia do exoesqueleto de adultos de Memphis moruus stheno (Pritwittz) (Lepidoptera, Nymphalidae, Charaxinae) / Exoskeleton morphology of the adult of Memphis moruus stheno (Pritwittz) (Lepidoptera, Nymphalidae, Charaxinae)

O presente trabalho visa fornecer subsídios para estudos morfológicos comparativos de Charaxinae neotropicais. Memphis moruus stheno (Prittwitz, 1865) é a segunda espécie neotropical de Anaeini e a primeira do gênero Memphis a ter sua morfologia detalhada. A morfologia externa é apresentada com descrições, ilustrações e imagens de microscopia eletrônica de varredura de estruturas da cabeça e apêndices cefálicos, região cervical, tórax e apêndices torácicos, abdome e genitálias masculina e feminina. A morfologia de M. moruus stheno é comparada com uma espécie do gênero proximamente relacionado Zaretis Hübner, [1819].

This study is intended to allow further comparative morphological studies on the Neotropical Charaxinae. Memphis moruus stheno (Prittwitz, 1865) is the second species of Anaeini and the first in the genus Memphis to have its morphology published in detail. The external morphology is presented with descriptions, line drawings and scan electron microscopy of the head and its appendages, cervix, thorax and its appendages, abdomen and both male and female genital armatures. Memphis moruus stheno is compared with a species of its closely related genus Zaretis Hübner, [1819].

Gomphonema Ehrenberg e Gomphosphenia Lange-Bertalot (Bacillariophyceae) do Rio Maurício, Paraná, Brasil / Gomphonema Ehrenberg e Gomphosphenia Lange-Bertalot (Bacillariophyceae) from Maurício river, Paraná, Brazil

Pouco se conhece sobre a biogeografia e variabilidade morfológica das espécies de Gomphonema e Gomphosphenia no Brasil. Gomphonema é um gênero bem representado em riqueza e abundância na flora algal perifítica, principalmente pela secreção de mucilagem pelo campo de poros, o que facilita a adesão das células aos substratos. As amostras analisadas foram removidas das porções vegetativas de Potamogeton polygonus Chamess. & Schltdl. e Egeria densa Planch., macrófitas coletadas no Rio Maurício, localizado no município de Fazenda Rio Grande, Paraná. A análise qualitativa do material resultou na determinação de 20 táxons. Onze espécies de Gomphonema e o gênero Gomphosphenia constituíram citações pioneiras para o Paraná. Os resultados de observações da ultra-estrutura de algumas espécies foi adicionado. A variabilidade do contorno valvar e os detalhes ultra-estruturais justificam futuras revisões taxonômicas de algumas espécies correlatas, como: G. gracile e Gomphonema sp.5, G. contraturris e G. salae, G. capitatum e G. laticollum.

The biogeography and morphological variability of Gomphonema and Gomphosphenia species are still poorly known in Brazil. Due to the secretion of mucilage by the apical pore fields, Gomphonema is a common genus in periphytic algal communities, being well represented in richness and density. Studied samples were removed from Potamogeton polygonus Chamess. & Schltdl. and Egeria densa Planch. gathered in Maurício river, Fazenda Rio Grande, Paraná State. Twenty taxa were identified. Eleven species of Gomphonema and the genus Gomphosphenia were first recorded in the state of Paraná. In addition, the results of ultrastructural observations were presented. Variability in valve outline and ultrastructural details warrant further attempts to clarify the taxonomy of closely related species, such as: G. gracile and Gomphonema sp.5, G. contraturris and G. salae, G. capitatum and G. laticollum.

Chave dicotômica ilustrada para a identificação de espécies de Thalassiosira Cleve (diatomácea) no estuário da Lagoa dos Patos e área costeira adjacente (Rio Grande do Sul, Brasil) / Illustrated dichotomous key for the identification of Thalassiosira Cleve species (Bacillariophyceae) from Lagoa dos Patos estuary and adjacent areas (Rio Grande do Sul, Brazil)

O trabalho apresenta uma chave dicotômica e uma tabela comparativa com as dimensões e características diagnósticas para a identificação de dezessete espécies de Thalassiosira (diatomáceas), comumente observadas no estuário da Lagoa dos Patos e na área costeira adjacente à sua desembocadura (~32º S e 52º W). Para todas as espécies estudadas são fornecidas ilustrações e comentários sobre os detalhes morfológicos importantes para a sua identificação em microscopia óptica, bem como imagens em microscopia eletrônica de varredura (MEV).

The paper presents a dichotomous key and a comparative table summarizing dimension data and diagnostic characteristics of seventeen Thalassiosira species (diatoms) commonly found in Lagoa dos Patos estuary and the coastal adjacent area (~32º S and 52º W). For all studied species, optic microscope illustrations and comments on significant morphological features are provided, together with scanning electron microscopy images.

Caracterização dos hemócitos de operários de Nasutitermes coxipoensis(Holmgren) (Isoptera: Termitidae) e avaliação hemocitária após parasitismo por Metarhizium anisopliae / Hemocyte characterization of Nasutitermes coxipoensis (Holmgren) (Isoptera: Termitidae) workers and hemocyte evaluation after parasitism by Metarhizium anisopliae

O objetivo desta pesquisa foi caracterizar morfológica e ultraestruturalmente os hemócitos de operários de Nasutitermes coxipoensis (Holmgren) e quantificar os tipos celulares 24h, 48h e 72h após inoculação com Metarhizium anisopliae. Seis tipos de hemócitos foram identifi cados: plasmatócito, granulócito, esferulócito, prohemócito, adipohemócitos e oenocitóide. Nenhuma alteração na morfologia dessas células foi evidenciada durante os intervalos. Entretanto, houve variações na proporção dos hemócitos em relação à testemunha para esferulócitos, adipohemócitos e oenocitóides, nos três intervalos de avaliação, e para plasmatócitos e granulócitos no intervalo de 48h. As causas potenciais dessa variação e suas implicações são apresentadas e discutidas neste artigo.

We aimed to characterize the morphology and ultrastructure of hemocytes of Nasutitermes coxipoensis (Holmgren) workers and to quantify the cell types 24h, 48h and 72h after inoculation with Metarhizium anisopliae. Six hemocytes types were identified, plasmatocyte, granulocyte, spherulocyte, prohemocyte, adipohemocyte and eonocytoid Hemocytes did not present any morphological alteration at the several observation periods, but they did have a change in their abundance, as observed for spherulocytes, adipohemocytes and eonocytoids at all intervals, and for plasmatocytes and granulocytes at 48h after host inoculation. We argue on the possible reasons and implications of the observed changes.

Características regionais sobre a ultra-estrutura das células principais do epitélio do ducto epididimal de Agouti paca / Regional ultra structural features of principal cells from the epididymal epithelium lining of Agouti paca

As células principais (P) do epitélio de revestimento do epidídimo de paca foram relacionadas com processos citofisiológicos de endocitoses do tipo adsortiva e de fase fluida, respectivamente, aparentemente realizando também secreção apócrina. Essas funções foram propostas embasando-se em características de ultra-estrutura das células P, em cujos citoplasma observaram-se um expressivo número de vesículas, com diferentes formas, tamanhos e presença de conteúdo internalizado em algumas das vesículas revestidas por endomembranas, ocorrendo ainda caveolas e vesículas diminutas localizadas junto à borda apical de microvilos. Ademais, observaram-se vesículas grandes e revestidas e/ou com superfícies lisas; endossomos, e lisossomos de localização predominantemente apical. Uma via de secreção apócrina foi sugerida com base na ocorrência de expansões (protrusões), citoplasmáticas intraluminais nas células P.

The principal (P) cells of epididymidis surface epithelium of Agouti paca were related to processes of adsorptive endocytosis and phase-fluid endocytosis, as well as protein secretion apparently also occur.These findings had been proposed on the base the cytoplasmic ultrastructural features of P cells in which were seen an expressive number of vesicles with several shapes, sizes and internalized content occurring also smaller pits and pale small vesicles located next to the apical brush border of microvilli. Moreover, occurred coated vesicles, smooth surface vesicles and great vesicles; multivesicular bodies, endosomes and lysosomes mainly viewed on supranuclear and apical positions. Presence of an appocrine secretory pathway was characterized in P cells through the occurrence of apical cytoplasmic expansions, protruding into the ducts epididymidis luminal compartment.

Anatomy and ontogeny of the pericarp of Pterodon emarginatus Vogel (Fabaceae, Faboideae), with emphasis on secretory ducts

Discrepant and incomplete interpretations of fruits of Pterodon have been published, especially on the structural interpretation of the pericarp portion that remain attached to the seed upon dispersal. The present work clarified these doubts and analyzed ultrastructural aspects of the Pterodon emarginatus diaspores using light and transmission electron microscopes. Cell divisions are prevalent among the initial phases of development, and the subadaxial and adaxial meristems form the fibrous inner mesocarp and the endocarp composed of multi-seriate epidermis, respectively. At the median mesocarp, numerous secretory ducts differentiate between the lateral bundles, by lytic process. After lysis of the central cells and the formation of the lumen, the ducts show unistratified secretory epithelium with dense cells; oil droplets are observed on the secretory epithelium and the subadjacent tissues. At maturity, the uniseriate exocarp and the outer mesocarp slough off in an irregular fashion, leaving the diaspore composed of a papery and brittle wing linked to a seed chamber that includes the median mesocarp composed of lignified cells, bordering vascular bundles and many secretory ducts whose epithelial cells develop large vacuoles that accumulate oleoresins. The Pterodon emarginatus fruit is a cryptosamara.

Interpretações discrepantes e incompletas têm sido conferidas ao fruto de Pterodon, especialmente no que tange à determinação estrutural da porção pericárpica que acompanha a semente na dispersão. Assim, com o objetivo de dirimir tais dúvidas e analisar a organização ultra-estrutural das estruturas secretoras presentes no diásporo de Pterodon emarginatus, realizaram-se estudos convencionais aos microscópios de luz e eletrônico de transmissão. Nas fases iniciais de desenvolvimento do fruto, prevalecem divisões celulares; pela ação do meristema subadaxial e do adaxial, formam-se, respectivamente, o mesocarpo interno fibroso e o endocarpo composto por epiderme multisseriada. No mesocarpo mediano, entre os feixes vasculares laterais, diferenciam-se numerosos ductos secretores lisígenos. Após a lise das células centrais e formação do lume, os ductos apresentam epitélio secretor uniestratificado, com células densas; gotas de óleo são observadas no epitélio secretor e tecido subjacente. Na maturidade, o exocarpo unisseriado e o mesocarpo externo, ambos fenólicos, descamam irregularmente, sendo o diásporo constituído pela ala papirácea e quebradiça, ligada ao núcleo seminífero que abrange o mesocarpo mediano de células lignificadas, margeando feixes vasculares e muitos ductos secretores, que apresentam acúmulo de oleorresina e cujas células epiteliais tornam-se vacuoladas. O fruto de Pterodon emarginatus é, portanto, uma criptossâmara.

Papilomatose laríngea: análise morfológica pela microscopia de luz e eletrônica do HPV-6 / Laryngeal papillomatosis: morphological study by light and electron microscopy of the HPV-6

Papilomatose laríngea é neoplasia benigna mais freqüente nas crianças, causada pelo HPV, principalmente subtipos 6 e 11 e caracteriza-se pela presença de lesões proliferativas exofíticas e recidivantes sobre a mucosa das vias aérea, em especial na laringe. Forma de Estudo: Clínico prospectivo. OBJETIVOS: Demonstrar alterações epiteliais morfológicas (pela microscopia de luz e eletrônica) em lesões papilíferas casadas pelo HPV-6. MATERIAL E MÉTODOS: Fragmentos de lesões de papilomatose laríngea, colhidos durante procedimento cirúrgico de quatro crianças (1 masculino, 3 femininas), foram submetidos à tipagem do HPV (por método de PCR), análise pela microscopia de luz e microscopia eletrônica (varredura e transmissão). RESULTADOS: Na tipagem, todos os papilomas eram do subtipo 6. A microscopia de varredura identificou projeções epiteliais de vários tamanhos, com células superficiais em descamação. A microscopia de luz demonstrou lesões exofíticas, revestidas por epitélio hiperplásico com coilócitos e binucleações, característicos do HPV. A membrana basal e o córion adjacente estavam íntegros. À microscopia eletrônica de transmissão identificou-se vacuolização perinuclear e alargamento das junções intercelulares. CONCLUSÕES: As alterações morfológicas apresentadas pelo HPV-6 demonstram o caráter não-invasivo da lesão, sendo necessário estudos morfológicos adicionais relacionando os outros tipos de HPV, considerados mais agressivos, com os achados ultra-estruturais.

Laryngeal papillomatosis is the most frequent benign neoplasia in children. It is caused by HPV 6 and 11. The lesions are exophytic and highly recurrent, compromising the airway mucosa, mainly the larynx. Study design - clinical prospective. AIMS: to show morphologic alterations of the epithelium (light and electron microscopy) in the HPV-6 lesions. METHODS: specimens of laryngeal lesions obtained during surgery of four children (1 male, 3 female) were submitted to HPV typing (PCR), light microscopy and electron microscopy. RESULTS: in all specimens, HPV type 6 was found. Epithelial projections were found by electron microscopy with superficial cells in desquamation. Light microscopy showed exophytic projections of the keratinized stratified squamous epithelium overlying a fibrovascular core. Koilocytes (vacuolated cells), suggesting the viral infection by HPV, were identified. No alterations were seen in the basement membrane and corion. Ultraestrutural analysis showed vacuolated cells with clear cytoplasmic inclusions, intercellular injuries and widening intercellular spaces. CONCLUSIONS: morphologic alterations of the epithelium in the HPV-6 lesions are superficial, and additional studies including the others HPV types are needed to show the more aggressive and extensive aspect of the disease.

Caracterização ultra-estrutural dos efeitos citopatológicos causados por toxinas de Bacillus sphaericus no instestino de larvas de Culex quinquefasciatus / Ultrastructural characterization of cytopathological effects of Bacillus

O Bacillus sphaericus (Bsp) é uma bactéria entomopatógena eficiente para o controle de Culex quinquefasciatus, um importante vetor da filariose e arboviroses. O fator larvicida do Bsp é a toxina binária (Bin) e a sua ação em C. quinquefasciatus depende da ligação ao receptor Cqm1. A ausência deste receptor no epitélio intestinal é o principal mecanismo de resistência à toxina Bin. Larvas resistentes a esta toxina, são susceptíveis ao Bsp IAB59 que, além da Bin, produz as toxinas Cry48Aa e Cry49Aa. O principal objetivo deste estudo foi caracterizar os efeitos de toxinas do Bsp nas células do epitélio intestinal de C. quinquefasciatus, utilizando como modelos larvas de uma colônia susceptível a todas as toxinas estudadas (S), de uma colônia resistente à toxina Bin (R2362) e de uma colônia resistente à Bin e Cry48Aa/Cry49Aa (RIAB59). Na primeira etapa, larvas não tratadas das colônias S e R2362 disseccionadas 30 min, 4, 6 e 48 h após a muda para o 4° estádio foram fixadas e processadas para microscopia eletrônica de transmissão (MET). A avaliação morfológica do epitélio intestinal mostrou que células de larvas R2362, ao final do 4° estádio, são caracterizadas por um intenso acúmulo de inclusões lipídicas, sugerindo que a ausência da a-glicosidase Cqm1 pode estar envolvida com alterações no metabolismo. Para caracterizar os efeitos causados pelas toxinas no epitélio intestinal, as larvas foram disseccionadas 1 e 6 h após o tratamento e processadas para MET. A avaliação ultra-estrutural da ação da toxina Bin nas células do epitélio intestinal mostrou que os principais efeitos em larvas S foram a vacuolização citoplasmática e destruição de microvilosidades. Estes foram observados exclusivamente em células que possuem o receptor Cqm1, demonstrando que esta molécula é essencial para mediar a ação da toxina Bin. Em células de larvas das colônias S e R2362, susceptíveis à Cry48Aa/Cry49Aa, o principal efeito destas toxinas foi a vacuolização mitocondria...

The larval midgut of Anticarsia gemmatalis (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae): light and electron microscopy studies of the epithelial cells

The morphology of the midgut epithelium cells of Anticarsia gemmatalis (Hübner) larvae is described by light and transmission electron microscopy. The midgut of A. gemmatalis is the largest portion of the digestive tract, with three distinct regions: proximal, media and distal. Its wall is formed by pseudostratified columnar epithelial tissue having four cell types: columnar, goblet, regenerative, and endocrine cells. The columnar cells are numerous and long, with the apical portion showing many lengthy microvilli and the basal portion invaginations forming a basal labyrinth. The goblet cells have a large goblet-shaped central cavity delimited by cytoplasmic projections filled with mitochondria. The regenerative cells present electron-dense cytoplasm and few organelles. The endocrine cells are characterized by electron-dense secretory granules, usually concentrated in the cytoplasm basal region.

A morfologia das células epiteliais do intestino médio de larvas de Anticarsia gemmatalis (Hübner) é descrita em microscopia de luz e eletrônica de transmissão. O intestino médio de A. gemmatalis é a maior porção do trato digestivo, apresentando três regiões distintas: proximal, média e distal. Sua parede é formada por um tecido epitelial pseudo-estratificado colunar, com quatro tipos celulares: células colunares, caliciformes, regenerativas e endócrinas. As células colunares, observadas em maior quantidade, são altas, apresentam longas e numerosas microvilosidades na porção apical e na porção basal as invaginações da membrana formam o labirinto basal. As células caliciformes apresentam uma grande câmara central delimitada por projeções citoplasmáticas repletas de mitocôndrias no interior. As células regenerativas têm o citoplasma mais elétron-denso e com poucas organelas. As células endócrinas são caracterizadas pela presença de grânulos secretores bastante elétron-densos concentrados principalmente no citoplasma basal da célula.

The effects of treatment with melatonin on the ultrastructure of mouse leydig cells: a quantitative study

Both the presence of receptors for gonadal steroids in the pineal gland and in vitro observations of direct action of melatonin upon Leydig cells, inhibiting testosterone secretion, indicate a direct connection between pineal gland and gonadal function. In the present study, we used a transmission electron microscope to analyze the morphologic parameters of Leydig cells from adult Swiss outbred white mice treated with daily subcutaneous injections of 100 µg of melatonin (N-acetyl, 5-methoxytryptamine), during 22 consecutive days, compared with sham-control animals which had only received the melatonin vehicle. The melatonin group of mice showed a decrease in nuclear volume and fractional nuclear volume; smooth and rough endoplasmic reticulum; mitochondria; and Golgi complex. Our data also showed an increase in cytoplasmic volume, fractional cytoplasmic volume, and lysosomes in these same animals. The results suggest that melatonin, directly or indirectly, alters the ultrastructure of mouse Leydig cells and possibly influences their secretory activity by inhibiting their capacity to secrete steroids.

No presente trabalho, utilizamos a microscopia eletrônica de transmissão para analisar os parâmetros morfológicos das células de Leydig de camundongos adultos, suíços outbred, tratados com uma injeção subcutânea diária de 100 µg de melatonina (5-metoxi-N-acetil-triptamina), durante 22 dias consecutivos, comparando-os com animais sham-controle que receberam apenas o veículo da melatonina. Os animais tratados com melatonina mostraram diminuição do volume nuclear, da fração volumétrica do núcleo, do retículo endoplasmático liso e rugoso, das mitocôndrias e do complexo de Golgi. Nos mesmos animais ocorreu, também, aumento do volume do citoplasma e da fração volumétrica do citoplasma e dos lisossomos. Esses resultados sugerem que a melatonina pode alterar, direta ou indiretamente, a ultra-estrutura das células de Leydig do camundongo, inibindo sua atividade de síntese, como a produção de esteróides.

Biflagellate spermatozoon structure of the hermaphrodite fish Satanoperca jurupari (Heckel, 1840) (Teleostei, Cichlidae) from the Amazon River

The ultrastructural features of the sperm were studied in the hermaphroditic teleost Satanoperca jurupari HECKEL, 1840 from Amazon River. Spermatocytes, spermatids and sperm develop in the testicular cysts among the different oocyte stages. Different stages of early spermatocyte development, mainly the ones with synaptonemal complexes were often observed. The mature spermatozoa belong to the introsperm type, with a short head (~ 3 mm long and 1.3 mum wide) without acrosome, short midpiece (~ 1.2 mum long and 1.8 mum wide) containing several mitochondria surrounding two centrioles and forming a mitochondrial collar. They have two flagella (each ~15 mum long) each of which has a common 9 + 2 microtubular pattern. Each flagellum has two opposite lateral cytoplasmic extensions that begin about 3 mum the midpiece still close to the end piece of flagellum.

Foram estudados aspectos ultra-estruturais do espermatozóide do teleósteo hermafrodita Satanoperca jurupari (HECKEL, 1840) do rio Amazonas. Em diferentes oocistos testiculares encontram-se fases evolutivas de espermatócitos, espermátides e espermatozóides. Nos estádios mais jovens, nos espermatócitos, foram observados os respectivos complexos sinaptonêmicos. O espermatozóide maduro do tipo "introsperm" apresenta cabeça pequena de ~ 3 mim de comprimento e 1,3 mm de largura, sem acrosoma, com uma pequena peça intermediária de ~ 1,2 mim de comprimento e 1,8 mim de largura, contendo algumas mitocôndrias esféricas, circundando os dois centríolos e formando um colar mitocondrial. Esse espermatozóide apresenta 2 flagelos, cada um com ~ 15 mim de comprimento e com a formação microtubular comum de 9 + 2. Cada flagelo tem 2 extensões citoplasmáticas lateralmente opostas, sendo formadas cerca de 3 mim abaixo da peça intermediária, acompanhando o flagelo até a parte final.

Análise ultra-estrutural de embriöes bovinos da raça Nelore / Ultra-structural analysis of Nelore embryos / Análisis ultra-estructural de embriones bovinos de la raza Nelore

O conhecimento da ultra-estrutura de embriöes bovinos, dentro das diferentes sub-espécies permite estabelecer características inerentes a cada uma delas, possibilitando o desenvolvimento de métodos eficientes para estocagem e conservaçäo desses embriöes. Diante disso,17 embriöes bovinos, da raça Nelore, foram preparados para análise ultra-estrutural, sob microscopia eletrônica. O processamento dos embriöes foi realizado no Departamento de Reproduçäo Animal da UNESP-Jaboticabal. Para tanto, os embriöes foram lavados sucessivas vezes para remoçäo do SFB, utilizado no meio de transporte, fixados em soluçäo de glutaraldeído a 1 por cento em tampäo cacodilato de sódio 0,15M e pH 7,6, desidratados em soluçöes com concentraçöes crescentes de álcool etílico, pré-incluídos, incluídos em cápsulas BEEM (Better equipment for electron microscopy), contendo resina EPON-812, submetidos em estufa à temperatura de 60§C por 72 horas, para polimerizaçäo, e seccionados. Devido às pequenas dimensöes, os embriöes inicialmente foram submetidos a secçöes semifinas(0,5µm), para que a linha de corte propiciasse visualizaçäo do trofoblasto(TF) e massa celular interna(MCI). Após a triagem dos cortes, realizaram-se secçöes ultrafinas (60-70nm), que foram colhidas em grades de cobre, coradas com acetato de uranila e citrato de chumbo e observadas ao microscópio eletrônico. Dos embriöes processados 64,71 por cento foram selecionados para análise ultra-estrutural. Observou-se que as células dos embriöes analisados apresentavam-se semelhantes às descriçöes para blastocistos de bovinos Bos taurus indicus. O trofoblasto era formado por células alongadas que constituíam duas partes distintas; o trofoblasto mural, que delimitava a blastocele, e o trofoblasto polar, que recobria as células da massa celular interna. Suas células estavam intimamente ligadas por complexos juncionais, seguidos por desmossomos. As superfícies externas dessas células eram cobertas por microvilosidades proeminentes, com filamentos axiais, enquanto suas superfícies internas apresentavam-se lisas, com junçöes comunicantes (do tipo gap) com as células da MCI. Possuíam organelas usuais como mitocôndrias, lisossomos, ribossomos e poliribossomos, retículo endoplasmático liso e rugoso e complexo de Golgi com forma e número variados. Observam-se também gotas lipídicas e numerosas vesículas. As células da MCI eram cubiformes, ligadas umas as outras por junçöes desmossômicas, apresentando coloraçäo...

The effect of treatment with melatonin upon the ultrastructure of the mouse pineal gland: a quantitative study

In order to evaluate melatonin implication in the regulating of its own secretory process by pinealocytes, we used morphometric techniques for transmission electron microscopy. In mice treated with 100 mg of melatonin (N-acetyl-5-methoxy-tryptamine) by daily subcutaneous injection, we observed a decrease in number and volumetric density of lysosomes. Our results showed that melatonin influences the secretory activity of pinealocytes and participates in a complex secretory regulating mechanism.

A fim de avaliar a implicação da melatonina no controle de sua própria secreção pelos pinealócitos, utilizamos técnicas morfométricas aplicadas à microscopia eletrônica de transmissão. Em camundongos tratados com doses subcutâneas diárias de 100 mg de melatonina (5-metoxi-N-acetil-triptamina) observamos uma diminuição do número e da densidade volumétrica dos lisosomos nos pinealócitos. Esses resultados mostram que a melatonina atua sobre a própria glândula pineal, participando de um complexo mecanismo regulador da secreção nos pinealócitos.

Estudo da interação de Leishmania amazonensis com fibroblastos de cultura primária de músculo esquelético e cardíaco de camundongos / Study of the interaction of Leishmania amazonensis in fibroblasts primary culture of skeletal and cardiac muscle of mice

Culturas primárias de fibroblastos foram obtidas a partir da dissociação de tecidos de músculo esquelético e cardíaco de embriões de camundongos suiços. Após 48h de cultivo a 37C e 5% CO2 formavam-se monocamadas que foram utilizadas para diferentes experimentos...Culturas de fibroblastos obtido de músculo cardíaco de embriões de camundongos irradiadas com raios gama foram infectadas com formas promastigotas de L. Amazonensis e tratadas com L-leu-Ome no quarto dia de infecção. este dia foi selecionado por apresentar os índices mais altos de infecção. Na concentração de 1nM nos tempos de 1, 2 e 24 horas os fibroblastos apresentaram parasitas destruídos, com percentuais de inibição da infecção de 16,63%, 10,68% e 84,36%, respectivamente. Na concentração de 2mM e nos mesmos tempos estes índices foram 13,78%, 25,71% e 95,9%. Nas culturas controle, os índices médios de infecção de 27,35% +- 7,56 (1 hora), 17,50 +- 4,09 (2 horas) e de 26,85 + - 8,27 (24 horas), confirmando os dados referentes à infecção de fibroblastos de músculo esquelético pelo mesmo parasita

Ultra-estrutura do parênquima hepático na esquistossomose mansônica hepato-esplênica / Ultrastructure of the hepatic parenchyma in hepatosplenic schistosomiasis

Oito biópsias hepáticas de pacientes com diagnóstico de esquistossomose hepato-esplênica avançada foram analisadas ultr-estruturalmente com a finalidade de caracterizar a organização do parênquima hepático, estrutura pouco modificada na fibrose esquistosomótica do ponto de vista da observação histológica convencional...As lesões pouco intensas, difusas ou focais dos hepatócitos refletiram as alterações na microcirculação intra-hepática, a regeneração dos hepatócitos processando-se individualmente e mantendo estruturalmente preservados tanto a vascularização quanto o sistema biliar no interior do lóbulo e consequentemente a função parênquima